東城以螢光顯微鏡觀察魚類18小時(shí)的胚胎
作者: 發(fā)布時(shí)間:2022-07-02 20:55:44點(diǎn)擊:1885
信息摘要:
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以螢光顯微鏡觀察魚類18小時(shí)的胚胎
探討藉由電穿孔處理精子,使精子攜帶有以CMV (Cytomegalovirus) 立即初期基因 (immediate early gene)
啟動(dòng)子(promoter) 驅(qū)動(dòng)的外源性加強(qiáng)型綠螢光蛋白基因 (enhanced green fluorescent protein, EGFP),
再藉由人工受精的方式,將此基因?qū)胨拈g魚(Barbus tetrazona) 的卵中,以期在受精卵中表現(xiàn)轉(zhuǎn)殖基因,
進(jìn)而得到基因轉(zhuǎn)殖四間魚。實(shí)驗(yàn)共得受精卵120 個(gè)。受精率68﹪、孵化率88﹪,此與未經(jīng)處理的控制組相比,
受精率有顯著的差別,但在孵化率上差別并不顯著。
以聚合酶連鎖反應(yīng) (polymerase chain reaction, PCR) 的方法偵測18顆受精后10小時(shí)的受精卵,
15顆呈正反應(yīng)。以螢光顯微鏡觀察受精后18小時(shí)的胚胎,全身呈螢光反應(yīng)。
證明以電穿孔法促使四間魚的精子作為傳遞外源性異質(zhì)基因的媒介是可行的。
關(guān)鍵字:電穿孔、加強(qiáng)型綠螢光蛋白基因、四間魚、轉(zhuǎn)殖、精子媒介。
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