東城利用電刺激可促使細胞融合-細胞實驗顯微鏡
作者: 發布時間:2022-07-02 20:47:23點擊:1595
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利用電刺激可促使細胞融合-細胞實驗顯微鏡
A. 受核卵母細胞的去核操作
哺乳動物的復制并非僅靠一個細胞即可達成,此一細胞必須借助卵
母細胞內所含發軔因子,將基因組再程序化作用后,始具有發育能
力。然因卵母細胞內原已擁有雙套的染色體,若不加以去除,它與
注入含兩套染色體的體細胞融合后,將形成四套染色體的異常現
象。因此,首要步驟是先將卵母細胞內的雙套染色體去除。
B. 細胞注入卵的顯微操作
利用顯微操作技術,將含有正常兩套染色體的單一細胞注入卵內。
C. 受核卵母細胞與注入細胞的細胞融合
供核細胞在注入卵膜間隙后,供核與受核細胞間無法自發性發生如
精卵接觸后的融合現象,而必須藉由外力迫使其融合。
利用電刺激可促使細胞融合,乃因細胞經電激處理后,細胞膜表面會形成約
0.5 納米的小孔,經證實,此小孔即為導引兩細胞發生融合的媒介。
D. 融合細胞的激活處理
體細胞復制時,雖供核細胞已融入卵母細胞內,但供核細胞融入
后,并無法激發如精卵融合后所產生的激活機制,因而需要以人為
激活方式,模仿精子激活卵母細胞。利用電刺激或酒精,增加卵母
細胞內鈣離子的濃度,或直接以化學試劑抑制細胞靜止因子的活
性,均可激活卵母細胞
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