豐臺細胞培養簡介-移動細胞觀察用倒置生物顯微鏡
作者: 發布時間:2022-07-02 20:54:58點擊:1816
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細胞培養簡介-移動細胞觀察用倒置生物顯微鏡
細胞培養
所謂的體外細胞與組織培養,是指在活體外利用人工供給的養分與
環境來維持細胞的生命。體外細胞培養需瞭解細胞生長週期,培養液特
性,細胞解凍、分盤、及植入支架(Scaffold),及細胞計數,
以下就各項實驗之目的加以說明:
●細胞解凍:冷凍細胞之活化原則為快速解凍,以避免冰晶重新結晶而
對細胞造成傷害,導致細胞之死亡。解凍的方法:
1. 自液態氮中取出冷凍管,立即放入 37°C 水槽中快速解凍。
2. 取出 0.9ml 解凍之細胞懸浮液,緩緩加入有培養基之 37°C培養容器內
(稀釋比例為 1:10~1:15),混合均勻,放入 CO2 培養箱培養,待細胞貼附隨即更換新鮮培養基,
另取 0.1ml 解凍細胞懸浮液作存活測試。
3. 若需去除冷凍保護劑,則將解凍之細胞懸浮液加入含有 5-10ml
培養基之離心管內,以 1,500 rpm, 離心 5 分鐘,移去上清液,加
入新鮮培養基,混合均勻,放入 CO2 培養箱培養。
細胞活化后,約需數日或繼代一至二代,細胞生長或特性表現才會
恢復正常﹙例如產生單株抗體或是其他蛋白質﹚,故解凍后的細胞需經
過培養后分盤始能做為實驗用
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