豐臺以螢光顯微鏡觀察魚類18小時的胚胎
作者: 發布時間:2022-07-02 20:55:44點擊:1883
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以螢光顯微鏡觀察魚類18小時的胚胎
探討藉由電穿孔處理精子,使精子攜帶有以CMV (Cytomegalovirus) 立即初期基因 (immediate early gene)
啟動子(promoter) 驅動的外源性加強型綠螢光蛋白基因 (enhanced green fluorescent protein, EGFP),
再藉由人工受精的方式,將此基因導入四間魚(Barbus tetrazona) 的卵中,以期在受精卵中表現轉殖基因,
進而得到基因轉殖四間魚。實驗共得受精卵120 個。受精率68﹪、孵化率88﹪,此與未經處理的控制組相比,
受精率有顯著的差別,但在孵化率上差別并不顯著。
以聚合酶連鎖反應 (polymerase chain reaction, PCR) 的方法偵測18顆受精后10小時的受精卵,
15顆呈正反應。以螢光顯微鏡觀察受精后18小時的胚胎,全身呈螢光反應。
證明以電穿孔法促使四間魚的精子作為傳遞外源性異質基因的媒介是可行的。
關鍵字:電穿孔、加強型綠螢光蛋白基因、四間魚、轉殖、精子媒介。
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