石景山過濾法-顯微鏡下菌落計數器計數總菌數操作步驟
作者: 發布時間:2022-07-02 20:59:53點擊:2273
信息摘要:
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目的
利用過濾大量液體樣品,如:飲用水等測定方法,以了解樣品之生菌數。
原理
使用細菌無法通過但液體可通過的無菌濾膜(045 μm),將濾膜裝設于濾器內且套入三角錐形瓶,
待真空抽氣過濾后,細菌就會滯留于濾膜上。接著以無菌操作技術將濾膜移至選擇或鑑別培養基上,經培養后,可計數濾膜上之菌落數以了解樣品之衛生程度
材料
無菌水或無菌085%生理食鹽水
平板空白培養基
設備儀器及其他用具
無菌鑷子
過濾裝置
濾膜(045 μm)
恒溫培養箱
菌落計數器
真空幫浦
滅菌容器
步驟與方法
此方法之操作流程如下:
準備樣品溶液:以滅菌容器量取樣品溶液至少20 ml。
過濾樣品溶液:裝置過濾器材后,以無菌鑷子將濾膜置于漏斗的底部上,而濾膜之格網面朝上。
將濾器漏斗與底座扣住。取10 ml樣品溶液注入漏斗中,啟動抽氣過濾。待樣品過濾后,漏斗內層以無菌水洗滌。
濾膜置于平板:中止真空抽氣(務必抽乾)后,松開漏斗,以無菌鑷子取出濾膜,置于平板空白培養基上。
細菌培養及菌落的計數:將培養皿倒置于37℃恒溫培養箱中,經24~48小時培養后以肉眼或于顯微鏡下觀察,
并使用菌落計數器計數總菌數。
實驗注意事項
若最后觀察之菌落數濃度過濃時,可適當的用無菌水或生理食鹽水稀釋。
中止真空抽氣時,需確認已完全抽乾才可停止,否則會影響結果。
實驗結果
觀察濾膜的生長狀況并計算其菌落數。
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