東城光學(xué)顯微鏡使用可見(jiàn)光為光源解析度約200到400納米
作者: 發(fā)布時(shí)間:2022-07-02 20:53:46點(diǎn)擊:1757
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光學(xué)顯微鏡使用可見(jiàn)光為光源解析度約200到400納米
遠(yuǎn)場(chǎng)熒光顯微術(shù)(far-field fluorescence microscopy)因高靈敏度、高訊噪比、非侵入性、高專一性、擷取影像快速、架設(shè)簡(jiǎn)易等優(yōu)點(diǎn),
成為近年來(lái)研究生物系統(tǒng)的重要工具。然而,遠(yuǎn)場(chǎng)光學(xué)顯微鏡受光學(xué)繞射極限限制,使用可見(jiàn)光為激發(fā)光源時(shí),解析度約200到400奈米,限制其生物應(yīng)用,
因此開(kāi)發(fā)超高解析度(super resolution)顯微術(shù),突破繞射極限成為重要的研究方向。近年來(lái),受激放射耗乏(stimulated emission depletion, STED)
顯微術(shù)是諸多超高解析度顯微術(shù)中,影像擷取速度最快且完全利用光學(xué)原理而開(kāi)發(fā)的技術(shù),
原理為利用一道甜甜圈型態(tài)且波長(zhǎng)與熒光波長(zhǎng)相符的STED光束與激發(fā)光重疊,使其周圍的受激分子放射耗乏回到基態(tài)而不放光,
每次僅取得接近STED光束中點(diǎn)、光束強(qiáng)度接近零處的數(shù)個(gè)分子的熒光,而達(dá)到超高解析度
架設(shè)STED顯微鏡,并觀察以電穿孔法(electroporation)或經(jīng)由胞吞作用(endocytosis)進(jìn)入HeLa細(xì)胞內(nèi),包覆有牛血清白蛋白(bovine serum albumin, BSA)
的熒光奈米鉆石粒子,單一35奈米的熒光奈米鉆石二維解析度達(dá)到40奈米。
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