豐臺顯微鏡下菌種形態(tài)或染色差異-細(xì)菌觀察研究
作者: 發(fā)布時間:2022-07-02 21:02:01點擊:2653
信息摘要:
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顯微鏡下菌種形態(tài)或染色差異-細(xì)菌觀察研究
真菌鑒定技術(shù)
真菌傳統(tǒng)檢測方法是由培養(yǎng)基上的菌落外觀、顯微鏡下菌種形態(tài)或染色差異等來鑒定
菌種,然而真菌外觀極為相近,容易造成鑒定錯誤,以物種的分類界、門、綱、目、科、
屬、種來看,以顯微鏡鑒定菌種準(zhǔn)確性往往只能達(dá)到菌屬(genus)而不能深入到菌種
(species),但惟有鑒定至菌種才可確認(rèn)其危害性。加上空氣采樣真菌的菌量相當(dāng)可觀,生
長速度慢,若要一一鑒定,并不是一項容易的工作。
由于分子技術(shù)的開發(fā), 3種常用于菌種之基因鑒定法為:
(1) 聚合酶連鎖反應(yīng)或定量聚合酶連鎖反應(yīng)(polymerase chain reaction, PCR 或
qPCR):可放大每種菌獨特之基因片段,也就是只有該種菌種之基因才可被放大
而被偵測到。這種方法受限在一次只能進(jìn)行一種菌的鑒識,且菌種序列必須為已
知。
(2) DNA 定序法(DNA sequencing):針對菌種部分基因放大后,將該片段基因之核
酸序列以 Sanger 定序法判讀出來。這種方法最可確認(rèn)菌種的正確性,但首要是
溷合二種菌時會造成判讀溷亂,故必先確保其為單一菌種。
(3) 限制性片段多樣性(restriction fragment length polymorphism, RFLP):先以 PCR 放
大某一基因,再以特定的限制酶(restriction enzyme)進(jìn)行剪切后,以電泳確認(rèn)基
因片段大小(size)。由于每種菌剪切之片段不一,可用以分辨菌種。
以上所述的方法,各有其優(yōu)劣
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